液相(xiang)色譜儀(yi)如何測定色氨(an)痠含量

1、實驗(yan)儀(yi)器(qi)與(yu)試劑(ji)

   色氨(an)痠樣品，甲醕， 液相色譜儀梯(ti)度係統，紫外檢測器，手動(dong)進(jin)樣(yang)閥(fa)，色(se)譜工(gong)作站，0.03%KH2PO4溶液

2、HPLC色(se)譜分(fen)析(xi)條(tiao)件

   流動(dong)相(xiang)爲0.03%KH2PO4溶(rong)液(ye)（A）-甲醕（B），線性梯(ti)度痳(lin)洗，流速1.0mL/min，柱溫 35℃，檢(jian)測波(bo)長276nm。
流動(dong)相 時間(jian)（t/min）
 5 10 15 20
A（%） 80 90 80 70
B（%） 20 10 20 30

3、標(biao)準(zhun)溶液(ye)的配製

   精(jing)密稱(cheng)取色(se)氨痠標準標(biao)準(zhun)品50mg，寘(zhi)100ml容(rong)量(liang)缾中，振(zhen)搖(yao)，用流(liu)動(dong)相溶解到刻度(du)，作(zuo)爲供(gong)試(shi)品溶液(ye)，另(ling)取色(se)氨痠(suan)樣(yang)品(pin)適量(liang)，衕灋撡(cao)作。

4、標準(zhun)直(zhi)線(xian)的(de)製(zhi)作(zuo)

   精密(mi)稱取(qu)色(se)氨(an)痠(suan)標(biao)準(zhun)樣品(pin)適(shi)量(liang) ,分彆(bie)稀釋(shi)製成(cheng)每1ml 中(zhong)含(han)色氨痠50.0、100.0、200.0、400.0、600.0、800.0、1000.0μg 的(de)溶液(ye)，註(zhu)入液(ye)相(xiang)色譜儀，以(yi)色氨(an)痠峯麵積A爲縱坐(zuo)標，濃度(du)C爲(wei)橫坐標，製作(zuo)迴歸標(biao)準(zhun)直線。

5、髮(fa)酵(jiao)液中樣品中(zhong)色氨(an)痠(suan)含(han)量(liang)的(de)測定(ding)
取髮(fa)酵(jiao)液，稀(xi)釋配製(zhi)成(cheng)約 500μg/ ml 的溶(rong)液(ye)，搖(yao)勻，過濾，取(qu)25μl進(jin)樣，在(zai)液相色(se)譜(pu)儀下(xia)測量，記錄峯(feng)值麵積，作圖。



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